程颖：循环细胞在小细胞肺炎临床研究中的进展

循环细胞内( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液体前列腺标本”，已在重新分配病态帕金森氏症、癌和结肝癌之前用于高滴血压评价。小细胞内肺癌(Small celllung cancer，SCLC)组织标本举例来说不足，且忽视合理的受控病情恶化重新分配和预测高滴血压的动物圣万。据统计些年来历史历史学家CTCs在SCLC之前的诊疗运用于透过了探索病态研究课题，断定CTCs对SCLC的诊断、分过渡期，受控病情恶化、重新分配，评量、高滴血压以及建立理论化病患方案等具不可或缺普遍病态，本文就CTCs在SCLC诊疗运用于之前的研究课题令人满意未予系统设计性。

一、SCLC病患者CTCs的检测方国法

CTCs的检测方国法主要有流式细胞内检测应用( fluocytometry，FCM)、逆转录一聚合酶脉动(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch系统设计、CTC集成电路(CTC-chip)应用和上皮细胞肾小球分离细胞内应用(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其之前CellSearch系统设计因其半自动化的操作平台，较高的特异病态、持久病态和可重复病态，视为最；也运用于的CTCs检测方国法。

早在2004年，Allard等率先运用于CelISearch国法检测了99实有肺癌（未罗列SCLC实有数）病患者的CTCs，随后Nagrath等采用CTC-chip国法检测了55实有肺癌病患者外周滴血C TCs。2009年之前的研究课题多采用CeIISearch国法检测SCI．C病患者外周滴血CTCs，然而该方国法由于对忽视上皮细胞内特征的细胞内可能会显现漏检不太可能，且与免疫磁珠及抗体相结合的CTCs无国法行某些先前的检测，诊疗运用于受到仅限于。

据统计些年来，随着聚乙烯科技的的发展，类似物CTCs表面圣万的特异病态识别分f润色的聚乙烯材料相结合旋流控应用的CTCs检测平台的研究课题受到广泛关注，2013年，《其本质》（Nature）杂志将CTCs聚乙烯检测选为最具创新病态和转化潜力的诊断新方国法，正因如此面病态引人注目。但就目前来看，这两项的CTCs检测方国法各有利弊，未有研究课题断定哪种方国法对SCLC的CTCs检测更有优势。着眼将来，亟需要开发特异病态、持久病态更高的CTCs检测应用，为SCLC的基础和诊疗研究课题带来突破。

二、CTCs在SCLC诊疗运用于之前的研究课题现状

（一）CTCs个数与SCLC的诊断、分过渡期

据统计些年来多项研究课题揭示CTCs个数素质与SCLC的诊断、分过渡期有密切关系0 2009年Tanaka等运用于CeIISearch国法检测了1 50实有7.5ml外周滴血CTCs，其之前肺癌1 25实有、非恶病态25实有，肺癌病患者都有116实有非小细胞内肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9实有SCLC。

研究课题结果揭示SCLC病患者CTCs阳病态率为66.70-/0（6实有／9实有），轻微很低NSCLC病患者的CTCs阳病态率(脑瘤25.9%，鳞癌40.9%；脑瘤对比SCLC，P

同年，Hou等运用于CeIISearch国法检测了50实有初治的SCLC病患者外周滴血CTCs，都有20实有仅限于期SCLC (limited disease，LD-SCLC)病患者和30实有广泛期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)病患者，较宽期ED-SCLC及LD-SCLC病患者的之前位CTCs个数分列237和2个/7.5ml滴血，7实有未检测CTCs的病患者均为LD-SCLC，确实CTCs个数素质与SCLC分过渡期相关。

雷同的结论在2012年被冲绳历史学家Naito等断定，历史历史学家在51实有SCLC病患者之前立用CeIISearch国法检测较宽期CTCs素质，结果揭示ED-SCLC,病患者的之前位CTCs个数为9.5个f 7.5ml滴血，而LD-SCLC仅为1个／7.51111滴血，实质性确实ED-SCLC病患者的CTCs素质很低LD-SCLC病患者。

（二）CTCs评量SCLC的及高滴血压

CTCs是否可作为评量SCLC和高滴血压的有救指称f,匙历史历史学家们之前在反思的问题。Houi等在2009年通过CellSearch国法检测了50实有SCLC病患者(LD-SCLC20实有，ED-SCLC30实有)的CTCs，断定CTCs>300个/7.5ml滴血的病患者及CTCs

较宽期CTCs>=50和

在该研究课题之前SCLC病患者的高滴血压界定个数预设8个/7.5ml滴血，以此将病患者分为CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年同样运用于CellSearch国法检测59实有SCLC病患者在较宽期、1周期化学疗国法后及4周期化学疗国法落幕后外固滴血CTCs素质，其之前ED-SCLC病患者38实有，LD-SCLC病患者2 1实有c较宽期有43实有病患者(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml滴血，CTCs>215个/7.5ml滴血和CTCs

经过1周期化学疗国法后病患者CTCs素质轻微降低，且1周期化学疗国法后CTCs

历史历史学家推算CTCs素质是SCLC高滴血压的独立影响因子，其之前1周期化学疗国法后CTCs素质是SCLC和高滴血压最强者的预测因子。

2013年ASCO发表的ECOG1508研究课题之前，历史历史学家尝试在155实有ED-SCLC之前投身类似物病患，并对其之前123实有病患者较宽期CTCs透过检测，结果揭示类似物病患无法延长ED-SCLC病患者的PFS和OS，但断定较宽期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml滴血的mPFS分列4.4和4.3个月底（P=0.07），OS分列10.7和7.2个月底(P=0.01)。历史历史学家认为虽然类似物病患没能降低ED-SCLC病患者的PFS和OS，但却断定了CTCs不太可能是SCLC病患者的高滴血压圣万。

最据统计，Igawa等尝试运用于OBP-401试验检测SCLC病患者外周滴血CTCso运用于OBP-401试验检测帕金森氏症和肺癌病患者CTCs的相关研究课题已有前期引述。研究课题纳入30实有韧治的SCLC病患者，29实有病患者(96%)外周滴血CTCs阳病态。在较宽期，21实有病患者CTCs

（三）CTCs受控SCLC的病情恶化和重新分配

这两项的研究课题表明通过检测CTCs的显现来受控SCLC的病情恶化和重新分配具不可或缺的诊疗普遍病态o Tanaka等研究课题断定CTCs素质‘j 125实有肺癌病患者（都有9实有SCLC病患者）令人满意轻微相关，比如说是与高处重新分配密切（AUC-ROC 0,873 p

基于这些数据，作者认为CTCs可作为受控肺癌高处重新分配的动物标记物。Natio等研究课题断定SCLC在较宽期、病患落幕后及病情恶化后CTCs的阳病态率分列68.6%、26.5%和67.6，预设SCLC病情恶化后外周学CTCs素质升高，时有发生高处重新分配脏器的为数为0、1和>=2的病患者其之前位CTCs个数分列2.0、7.5和21个/7.5ml滴血,预设CTCs素质与高处重新分配脏器的为数有关，高处重新分配越多，CTCs个数越高（p

三、CTCs在SCLC诊疗运用于之前的探索方向

病情恶化和重新分配是导致病患者病患收场和致死的主要原因，幸而的病情恶化和重新分配并采敢鼓励合理的病患措施可显著降低病患者成功率。然而，由于SCLC忽视必需要受控病情恶化和重新分配的动物圣万，且正因如此检测和检测无国法断定旋重新分配灶及旋小残留病灶，导致时有发生病情恶化和重新分配的SCLC病患者不用即时接受诊断和病患。

诊疗之前部分LD-SCLC的病患者高滴血压关联病态较大，预设有些仅限于期的病患者在诊断时不太可能已时有发生了检测和不用断定的旋重新分配而视为潜在的广泛期病患者。通过检测外周滴血CTCs的显现及为数巨大变化从而对SCLC病患者体内状态透过实时、动态地受控和评价，幸而的病情恶化、重新分配，将有助于诊疗医生对病患时机的把握和病患策略的并不需要要，但究竟CTCs的为数或巨大变化个数为多少时必需要简单反映SCLC的病情恶化或重新分配亦然不清楚，需要要更多的循证医学证据未予支持。

CTCs在评量SCLC病患者病患方面的运用于亦然始终保持探索过渡期，病患更实质性之前CTCs为数的巨大变化与SCLC病患者化学疗国法的一致病态及其与SCLC病患者放疗时机的并不需要要等问题在将来需要大量的诊疗研究课题。据统计5年，对CTCs是否可作为SCLC病患者高滴血压量化的研究课题不断增多，但SCLC最佳的高滴血压CTCs界定个数已有定论，歧异颇多。

其之前3项来自Hou、Naito、Hiltermann的研究课题将SCLC的高滴血压CTCs认定个数分别预设为50、8和2个／7.5ml滴血，关联病态很大，这不太可能与研究课题采用的统计学方国法不尽相同以及入组样本量较少有关。更实质性意大利历史学家Normanno等主张将ED-SCLC和LD-SCLC病患者分开研究课题，对较宽期、l周期化学疗国法后CTCs以及病患前后CTCs的巨大变化个数分别预设高滴血压界定个数，为将来的研究课题提供了一新简而言之。因由所在的科研院所团队也正致力于法制SCLC病患者高滴血压最佳CTCs界定个数的研究课题，结果令人期盼。

的理论化病患是病患模式的的发展方向。SCLC病患者对化学疗国法药物的反应存在轻微的个体关联病态，其主要原因不太可能与复杂的异质病态、基因表达关联病态及多态病态有关。所以，逐步明晰SCLC的基因学特征对实现确实普遍病态上的SCLC理论化病患尤为不可或缺。更实质性法制历史学家王洁等研究课题工作人员通过运用于单细胞内基因PCR行为对病患者单个CTC透过正因如此基因、外显子基因PCR。

在此项研究课题之前，谢晓亮讲师发明的多重退火和环化循环的扩增应用(MAIBAC)，获得成功实现了对病患者外周滴血单个CTC的正因如此基因扩增和深度PCR，在单个细胞内素质探测正因如此基因基因拷贝数病态状(CNVs)和单核酸病态状(SNVs)o单细胞内素质CTCs基因PCR应用可即时提供如乙型肝炎基因突变等理论化病患所需要的不可或缺信息，同时也为将来SCLC类似物药物的开发提供应用支持。

SCLC组织标本难以换取，限制了先前各项检测和研究课题的开展，而能用CTCs构建的SCLC循环细胞内移植瘤( CTC-derived explants，CDXs)模型，有望化解这一棘手难题。最据统计，Hodgkinson等尝试将6实有ED-SCLC病患者lOml外周滴血之前的CTCs提取后静脉注射到免疫缺陷果蝇皮下，结果在4只果蝇身上产生了CDXs，确实SCLC病患者的CTCs具致瘤病态。

同时运用于CelISearch国法检测这6实有SCLC病患者的CTCs，结果揭示获得成功产生CDXs的4实有病患者的CTCs个数均>400个／7.5ml滴血，而另外2实有未产生CDXs的病患者其CTCs个数分列222和20个／7.5ml滴血，预设SCLC的CTCs致瘤病态与外周滴血CTCs教量有关。实质性分析断定相较于化学疗国法持久病态SCLC，化学疗国法乙型肝炎病态SCLC病患者的CDXs倍增小时窄、植被更实质性。对3实有CDXs给予顺铂和依托泊苷化学疗国法药物，其持久病态左至右为CDX3>CDX2>CDX4，相应病患者的OS分列9.7.3.5.0.9个月底，预设对CDXs透过排泄药敏试验可以间接反应病患者生存小时。

该研究课题揭示部分SCLC的外周滴血CTCs具干细胞内特病态，可透过排泄培养、产生与原发高度雷同的CDXs，为SCLC病患者的排泄药敏试验、乙型肝炎机制分析等一系列检测和研究课题提供了足量的组织，化解了SCLC病患者标本举例来说不足的问题。

结论

从现行的研究课题可以看出，虽然CTCs在SCLC之前的诊疗运用于仍始终保持探索过渡期，但前景广阔。目前，诸多转化病态研究课题正在透过之前，相信随着研究课题的不断深入，CTCs有望视为SCLC的突破口，期盼CTCs在SCLC的领域之前为我们带来惊艳。

撰稿人： 碧